花卉的组织培养(花卉组织培养要怎样消毒灭菌)

2024-05-10 21:52:46

消毒灭菌:消毒灭菌非常重要,关系到组织培养的成败。污染的途径是器皿、用具、材料的带菌,以及接种室的空气、墙壁、地板等的不清洁,故必须针对所提及的几方面,进行严密的消毒灭菌。

第一、培养基消毒:将配制分装好培养基的三角瓶或其它容器放入高压灭菌锅中,在15磅/英寸2的压力下,经20分钟高压灭菌即可。

第二、器皿与用具的消毒:接种用具及玻璃器皿、洗涤材料用的无菌水,用牛皮纸包好后和培养基一起放在高压灭菌锅中消毒灭菌。

第三、接种室消毒:接种室的地面及墙壁,在接种前后均要用1:50的新洁尔敏湿性消毒,每次接种前还要用紫外线灯照射消毒30~60分钟,并用70%的酒精,在室内喷雾,以净化空气,最后是超净台台面消毒,可用新洁尔敏擦袜及70%酒精消毒。

第四、材料处理及消毒:花卉组织培养取嫩茎、花托、叶柄、叶片均可,取得材料后,需先清理,去掉多余部分,然后冲洗、洗涤剂洗涤、漂清后放入接种室或超净台上,用70%的酒精浸泡半分钟,进行表面消毒,再在10%的漂粉溶液中消毒10分钟左右,取出后用无菌水冲洗4~5次,即可接种。

一般材料的选择以幼嫩部分为好。草花用嫩茎、花托为好;球根花卉用茎顶、鳞茎盘、鳞叶等为好。

组织培养已经在花卉的育苗上得到了广泛的应用,如大花蕙兰、蝴蝶兰、非洲菊、凤梨类、花烛类等主要用组织培养育苗,脱毒、复壮也用组织培养育苗。组织培养也叫微体繁殖,是根据植物细胞全能性的原理,在无菌的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞、原生质等在适宜的培养基上培养,促其分裂分化,变成幼苗和成苗的技术。

(1)化学实验室。一般需15~20米2的房间。室内有供仪器洗涤、晾干、配制药剂和培养基的设备;有各种试管、三角瓶、烧杯、量筒、吸管等玻璃器皿;有精确度0.1克天平用来称量蔗糖、琼脂。精确度1毫克天平用来称量大量元素、精确度0.1毫克的分析天平用来称量微量元素和激素。至少有精确度0.1克和0.1毫克两种。备有所用的各种无机盐、维生素、氨基酸、糖类、琼脂、生长调节剂等。还要有冰箱、烘箱、高压蒸汽灭菌锅、水浴锅等。

(2)接种室。由两间连在一起的房间组成,其中一间作准备室,另一间作接种室,都要有照明灯和紫外灯。接种室内摆放操作台,放置酒精灯、接种工具、试管、三角瓶等。有条件的最好用超净工作台,并将超净工作台放在无菌室内。经济条件差也可用接种箱来接种,但生产量大时用起来不方便,费工。

(3)培养室。用于将接种到试管、三角瓶、罐头瓶等玻璃容器内的微小植物体(外植体)进行培养生长的场所。要有放置玻璃容器的培养架。要有控温设备,能调节和保持恒温的能力。要有照明和调节光照度的能力,并设有定时器加以自动控制。

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